
导致不孕的原因,其中男性因素约占40%,在进行不孕的治疗过程中,做人工授精或试管婴儿,男性的角色仅仅只需提供他们的生殖细胞-精子。
精液中,精子占5%,精浆占95%,精浆是由副性腺的分泌液组成:其中60%来自于精囊腺液,30%来自于前列腺液,含液化因子、锌、枸橼酸和酸性磷酸酶等成分,少量来自尿道球腺液和副睾液等。
在自然受孕时精浆有助于精子顺利进入女性阴道,并有助于精子穿透宫颈黏液,等精子进入子宫颈后,精浆就流出体外。
在应用于子宫腔内人工授精(IUI)或体外受精(IVF)等辅助生育技术都需要处理精液,以去除精浆,避免子宫颈等自然屏障的阻碍。
由于精浆并非无菌,而且精液中某些成分可刺激子宫收缩引起疼痛,所以我们要将精子从精液中分离出来。制备出的精子悬浮液,含高比例形态正常、活动力强的精子,且没有杂质和其他细胞以及死精子,这样筛选过的精子就可以使用于人工授精(IUI)和体外受精(IVF)。
精液处理方式有许多种,目前最常用的有精子上泳法(Swim-up)与密度梯度离心法。
简单的洗涤法
就是用培养液与精液等量混合,直接离心,收集沉淀的精子团块,该方法可回收最多的精子,但夹杂死精子和其他细胞杂质;一般精子数量极度稀少,活动力极差的精液采用此法,且必须搭配进行试管婴儿的单一精子显微注射(ICSI)。
直接上游法
是根据精子的泳动能力来选择活动力佳的精子。将培养液加到液化的精液上方, 也可以将精液加到培养液的下方,静置30分钟至60分钟,期间活动的精子就会自动游泳到培养液里,只要将聚集在培养液表层上方的精子收集起来备用即可。
非连续密度梯度离心法
将精液放置在不同密度梯度培养液的上方,在离心过程中由于死亡精子与活动精子的密度不同而加以分离,常用上层40%和下层80%的密度梯度液,加上活动精子主动游动,穿过梯度液在离心管底形成一个松软的沉淀团,可获得大部分活力很好的精子,且不含碎片、白血球、非精子细胞。
三种方法中,非连续密度梯度离心法在活动精子的回收率上明显高于上游法,而且最终精子悬液中精浆成分污染也低于上游法。
经过上述处理过的精子,基本上可以应用于人工授精、体外受精及单一精子显微注射术(ICSI)。 对于精子质量不佳,包括数量稀少 、活动力不佳 、精子形态异常率高的,体外受精(IVF)已不可行,只有考虑进行单一精虫显微注射术。